NK 细胞通过 Qa-1-NKG2A 抑制途径调节活化的 CD4+T 细胞

概括

Qa-1-NKG2A 相互作用保护活化的CD4 + T细胞免于被一部分NKG2A + NK细胞裂解，并且对于T细胞扩增和免疫记忆的发展至关重要.。这种 Qa-1-NKG2A 相互作用的抗体依赖性阻断导致活化的自身反应性T细胞的有效 NK依赖性消除和实验性自身免疫性脑脊髓炎的改善。这些发现扩展了NK系统的功能范围，包括调节适应性T细胞反应，并提出了一种新的临床策略，用于在自身免疫性疾病和移植的背景下消除抗原激活的T细胞。

介绍
  自然杀伤 (NK) 淋巴细胞在体外识别和有效裂解活化 T 细胞的能力可能允许这些细胞参与这一过程，NK 细胞还可以通过消除抗原呈递树突细胞 (DC) 或通过产生抑制性细胞因子来下调适应性免疫反应。定义 NK 细胞调节作用的一种方法是发现NK细胞活化受到靶细胞上Qa-1-Qdm配体与活化NK细胞上抑制性CD94-NKG2A 受体之间相互作用的严格限制，这里称为Qa-1-NKG2A相互作用。
  Qa-1–Qdm配体是由主要组织相容性复合物(MHC) Ib 类分子Qa-1 、β 2 m、以及从 MHC I 类前导序列(Qdm) 以TAP依赖性方式衍生的肽。Qa-1–Qdm 和 CD94–NKG2A之间的相互作用通常会抑制NK活性。尽管Qa-1在RNA水平上在许多细胞类型中表达，Qa-1–Qdm表面蛋白的表达仅限于活化的T和B淋巴细胞和树突状细胞，允许该配体选择性地标记免疫细胞的中央三联体。
方法
  我们检验了以下假设：活化T细胞上的Ib类MHC分子Qa-1-Qdm 与NK细胞上的CD94-NKG2A 受体之间的抑制性相互作用保护活化的T细胞免受NK 裂解和对于克隆通过自身反应性T细胞扩展和发展免疫记忆。我们发现Qa-1缺陷型CD4 + T细胞未能经历抗原诱导或稳态扩增，这是由于对特定NK细胞亚群的裂解敏感性增加所致。此外，慢病毒介导的Qa-1-Qdm在自身反应性CD4 + T 细胞上的表达挽救了自身反应性T细胞克隆的扩增，而抗体依赖性中断 Qa-1-NKG2A 相互作用抑制了实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）。

结果

 

NK 裂解对Qa-1缺陷型CD4 + T细胞的缺陷扩增

  我们最初定义了Qa-1对保护扩张的CD4 + T细胞免受Rag2缺陷宿主中NK 裂解的贡献。与Qa-1野生型 (WT) CD4 细胞的剧烈扩增相比，Qa-1缺陷型 CD4 + T 细胞在Rag2 -/-宿主中未能在 2 周内进行稳态扩增。Rag2 -/-（NK 细胞充足）宿主中Qa-1 缺陷型 CD4 细胞的缺陷扩增在Rag2 -/- Prf1 -/-（NK 细胞缺陷型）宿主中恢复（图A）。扩增表达OTII T 细胞受体(TCR)的 Qa-1 缺陷型 CD4 + T 细胞，特异于鸡与MHC IIb类结合的卵清蛋白(OVA) 323-339 肽在 Rag2 -/- 宿主中也严重受损，在Rag2-Prf1-/-宿主中恢复。该模型测量 CD4 细胞的抗原依赖性扩增，因为除非在第0天提供OVA 肽，否则在第7天和第14天没有恢复大量的OTII CD4+T 细胞。Qa-1缺陷型CD4+T细胞Rag2-/-宿主依赖于NK细胞，因为Rag2-/-Prf1-/-用纯化的NK细胞重组的宿主阻止了抗原诱导的 Qa-1 缺陷型OTII + CD4 细胞的扩增（图B）。因此，Qa-1的表达保护活化的 CD4 细胞免受 NK 裂解，并且对于稳态和抗原诱导的 CD4 细胞扩增都是必不可少的。

  图Qa-1 WT 和 Qa-1 缺陷型 CD4 + T 细胞的增殖
  (A)从 C57BL/6 (B6) Qa-1 WT 或 B6 Qa-1 缺陷 (N11) 小鼠中分离的CD4 + T 细胞被转移到同基因Rag2 -/-或Rag2 -/- Prf1 -/-宿主中。14 天后，计数来自脾脏和 LN 的 CD4 + T 细胞。数据来自三个有代表性的实验，其中每组由 3-4 只小鼠组成。图表显示平均值 ± SD (n = 3)。
  (B) 将纯化的 Qa-1 WT 或 Qa-1 缺陷型 OTII CD4 + T 细胞转移 (10 6 /小鼠) 到Rag2 -/-或Rag2 -/- Prf1 -/-宿主中，同时免疫 50 μg OVA肽在 CFA 中乳化。14天后通过计数LN和脾脏中的CD4 + V β 5 +细胞来监测OTII细胞的增殖。从Rag2 -/-小鼠的脾细胞中纯化的NK 细胞(0.5 × 10 6 )与 Qa-1 缺陷型 OTII 细胞共转移到Rag2 -/- Prf1 -/-主机，如所示。数据来自三个有代表性的实验，其中每组由 3-4 只小鼠组成。图表显示平均值 ± SD (n = 3)。
  (C) B6 Qa-1 WT 和 Qa-1 缺陷小鼠的外周 T 细胞数量：来自5 至 6 周龄 Qa-1- 的合并脾脏和淋巴结的 CD4 +和 CD8 + T 细胞总数缺陷（KO）小鼠或其野生型（WT）同窝小鼠（4-6只小鼠/组）。图表显示平均值 ± SD (n = 4)。
  (D) Qa-1 缺陷或 WT 小鼠在大约 10 周龄时进行胸腺切除术 (TX) 或假胸腺切除术。在 10周龄（3 只小鼠/组）的 Qa-1 WT 或 Qa-1 缺陷小鼠的胸腺切除术或假胸腺切除术后6 周，测量外周淋巴组织中 CD4 +和 CD8 +细胞的数量。显示的数据代表 3 只合并小鼠的平均值。